豬傳染性胸膜肺炎ELISA抗體檢測試劑盒說明書

【獸藥名稱】

通用名  豬傳染性胸膜肺炎ELISA抗體檢測試劑盒

商品名  無

英文名   Actinobacillus pleuropneumoniae ELISA Antibody Kit

漢語拼音  Zhuxiongmofeiyanfangxianganjun ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分與含量】

【作用與用途】  用于檢測豬血清中的豬傳染性胸膜肺炎抗體。

【樣品處理】  取豬全血，待血液凝固后4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，收集上清。也可采集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，無溶血。

【洗滌液配制】  使用前，將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作20倍稀釋（例如：10ml的濃縮洗滌液加190ml純水），混勻，置2～8℃可保存7日。

【樣品初步稀釋】  先將待檢血清樣品在血清稀釋板中按1:200的比例稀釋（例如：在血清稀釋板中先加入300μl樣品稀釋液，再加1.5μl待檢血清）。不同的樣品要注意換吸頭。樣品在稀釋過程中要充分混勻。

【操作步驟】

    1  取抗原包被板（根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用），用稀釋好的洗滌液洗板1次（300µl/孔）后拍干。在抗原包被板中分別加入稀釋好的血清樣品100μl，充分混勻。對照各設(shè)2孔，待檢樣品設(shè)1孔，輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置25℃溫箱孵育30分鐘。

2  棄去孔中的液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300μl，棄去洗滌液，并在吸水紙上拍干，共計洗滌5次。

3  每孔加酶結(jié)合物100μl，置室溫25℃溫箱孵育30分鐘。

4  棄去孔中的液體，洗滌5次，方法同2。

5  每孔先加入底物顯色液100μl，置室溫（20～25℃）下避光顯色10分鐘。

6  每孔加終止液50μl，混勻后測定結(jié)果。

【結(jié)果判定】

     在酶標(biāo)儀上測各孔的OD_450nm值。試驗成立的條件是：陰性對照孔平均OD_450nm值應(yīng)＜0.5，陽性對照孔平均OD_450nm值應(yīng)＞0.6。

    S為樣品孔OD_450nm值，P為陽性對照孔平均OD_450nm值，計算樣品S/P值。

若S/P值≥0.3時判為陽性；若S/P值＜0.3時判為陰性。

【注意事項】  

(1) 各液體試劑使用前應(yīng)充分搖勻。

(2) 不同批號試劑盒的試劑組份不能混用。

(3) 酶標(biāo)板拆封后應(yīng)避免受潮。

(4) 使用者應(yīng)遵守國家有關(guān)無害化處理等相關(guān)法律、法規(guī)。

(5) 使用完畢后，將所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都進行滅活處理。

【規(guī)格】  96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【貯藏與有效期】  2～8℃保存，有效期為12個月。

僅供科研使用