豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

說(shuō)明書

【獸用名稱】 

通 用 名:豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

商 品 名 無(wú)

英 文 名:Diagnostic Kit For Antibodies To PorcinReproductive and Respiratory Syndrome Virus（PRRSV Ab）,ELISA

漢語(yǔ)拼音:Zhufanzhiyuhuxibingdu ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要組分與含量】

【作用與用途】  用于檢測(cè)豬血清中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體。

【注意事項(xiàng)】

（1）實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒所有組分取出置溫箱（25℃± 3） 回溫至少30 分鐘，實(shí)驗(yàn)完成后 放回2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物，屬正常現(xiàn)象。

（3）請(qǐng)?jiān)谠噭┖幸?guī)定的有效期內(nèi)使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒(méi)有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi)，于 2～8℃存放。

（5）避免底物顯色液暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。

（6）先使用血清稀釋板稀釋完所有的待檢血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到抗原包被板上， 使反應(yīng)時(shí)間一致。

（7）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

（8）嚴(yán)格按照操作程序，仔細(xì)的吸液、計(jì)時(shí)，充分洗滌，對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常必 要的。

（9）用過(guò)的材料要無(wú)害化處理，處理時(shí)遵照當(dāng)?shù)?、區(qū)域以及國(guó)家法規(guī)。

【用法與判定】

1    用法

1. 1    樣品準(zhǔn)備  取動(dòng)物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 離心 10 分鐘，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清應(yīng)清亮，無(wú)溶血。

1.2    洗滌液配制  使用前，將 10 倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作 10 倍稀釋（例如： 10ml 的濃縮洗滌液加上 90ml 純水），混勻。置 2~8℃保存，可保存 7 日。

1.3    待檢血清和對(duì)照的稀釋

1.3. 1    待檢血清的稀釋   用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋 （例:將5 μl樣本加至195 μl樣本稀釋液中）。

1.3.2    對(duì)照的稀釋  陰陽(yáng)對(duì)照不用稀釋。

1.4    操作步驟

1.4. 1    加樣：根據(jù)樣本數(shù)量，取所需板條，檢測(cè)時(shí)，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各2孔，分別加入不用稀釋的陰、陽(yáng)性對(duì)照血清100 μl于相應(yīng)孔中（可不設(shè)空白對(duì)照）。其余為樣本孔，每孔加100 μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本。

1.4.2    溫育：加樣后，蓋上蓋板膜，置37 ℃溫育30 min。

1.4.3    洗板：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿反應(yīng)板孔，靜置10 s，直接甩出，洗滌3次，最后一次洗滌后吸干板內(nèi)液體。

1.4.4    加酶：每孔加酶標(biāo)記物100 μl。

1.4.5    溫育：加好酶標(biāo)記物的反應(yīng)板蓋好蓋板膜，置37 ℃溫育30 min

1.4.6    洗板：同步驟1.4.3。

1.4.7    顯色：每孔加顯色劑100 μl，振蕩混勻，37 ℃避光反應(yīng)10 min。

1.4.8    終止：每孔加終止液50 μl，振蕩10 s，充分混勻，終止后即讀數(shù)。

1.4.9    讀數(shù)：以450 nm/ 630 nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)，讀取各孔吸光度值（OD值）。充分混勻，終止后即讀數(shù)。

2    判定

2. 1    成立條件  陽(yáng)性對(duì)照孔的平均OD值≥0.60，陰性對(duì)照孔的平均OD值＜0.40。

2.2    結(jié)果判定  樣品中抗體存在與否，或樣本中抗體的相對(duì)水平的高低由S/P值決定，S/P值計(jì)算時(shí)按以下方式處理:

 S/P=(樣本OD450/630值－NC)/(PC－NC)

其中NC表示陰性對(duì)照孔平均OD450/630值（若小于0.05，則按照0.05計(jì)算），

PC表示陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD450/630值；

當(dāng)樣本的S/P≥0.20時(shí)判為陽(yáng)性；

樣品S/P值＜0.20時(shí)判為陰性。

【規(guī)格】  96 孔/盒或192 孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為 12 個(gè)月 

僅供科研使用